배지를 suction하여 제거한다.
② PBS 5ml를 넣는다.(washing)
③ PBS를 suction하고 0.5x TE를 0.1배 volume, 즉 0.5ml 넣어준 후 cell에 고르게 퍼지게 한 후 37℃ incubator에 2분 정치한다.
④ 10% FBS가 포함된 DMEM배지를 5ml 넣어준 후 pipeting 한다.
⑤ Cell culture dish에 seeding한다.
(2) Virus infection
① 배지를 suction하여 제
배양접시에서 떼어서 새로운 배양접시에 옮겨주어야 하는데, 이를 계대배양이라고 한다.
3. 세포 성장 및 증식
① 적응기 or 유도기
- 세포를 새로운 배지에 접종하여 배양할 때 배지에 적응하는 시기로 세포가 새
로운 환경에서 증식하는데 필요한 각종 효소 단백질을 생합성하는
배양병은 2시간내 검사실로 수송
혈액배양병은 냉장이나 냉동하지 말것
수기법
액체배지를 사용
매일 혼탁도의 변화, 용혈, 가스생산 집락형성 등을 관찰
균의 성장이 확인 될 때까지 7일간 시행, 마지막 날에는 호기성 배양병에서 맹계대배양을 실시
자동 검출기(BacT/Alert)(BACTEC)
상품화된배지
1. 불멸화 세포주의 가치
1.1. 기존 단백질 생산의 단점
어떤 상품이 업그레이드가 되었다면 그 전의 것에 단점이 있었기 때문일 것이다. 불멸화 세포주도 그러한 것의 일종이다. 업그레이드라는 말이 언어적으로 딱 들어맞는 말인지는 모른다. 하지만 정상적인 세포가 불멸화 세포주가 됨으로서 얻
유용한 장점을 가지고 있다. Cell cycle position에 영향을 받지 않는 것으로 보고되어 asynchronous로 배양된 세포에 적용가능하고 세포주기 stage가 동일할 필요가 없는 primary 세포에서도 적용가능하며 장비면 에서도 다른 short term test에 요구되는 것보다 훨씬 적다는 장점을 지니고 있다.
1.2. 원리 및 의의
배양 시도
1963-5(Ham) 혈청 공급 없이
CHO cell cloning
1970(Sato) 혈청 대신 호르몬
첨가 cell line 무혈청 배양
성공
Human embryonal kidney, SV40 and large T antigen transformed
produce therapeutic proteins and viruses for gene therapy
very easy to grow
transfect very readily
Contains the
SV40 Large T-antigen
Design
43)튜렛 증후군(Tourette syndrome)
(1) 튜렛 증후군이란?
튜렛 증후군은 경련(tics)이라 불리는 음성 통제불능과 반복된 무의식적 행동에 의해 특성화된 신경장애로 유전된다. 몇몇 경우에서 쓰는 부적절한 단어와 문장을 사용한다. 이병은 일반적으로 18세 전에 발생한다. 튜렛 증후군은 모든 민족에서 발
계대배양의 원리
세포 증식을 위해 새로운 배양접시에 옮겨 세포의 대(代)를 계속 이어서 배양하는 방법
1. 배양 접시에서 세포를 배양
2. 배양 접시의 바닥에 한 층으로 붙어서 증식
3. 계속 분열후 공간이 부족 하면 증식을 멈춤
(2) 세포성장 및 증식
① 유도기 (lag phase)
세포를 새로운 배지에 접
Cell Culture
∙ What is cell culture?
생물체의 조직편이나 조직에서 분리된 세포들을 생물체내의 환경과 동일한 배양시스템에서 유지시켜 줌으로써 조직이나 세포의 원래 기능을 보유하도록 하는 기술의 한 방법
∙ 동결보존이 필요한 이유
주세포의 경우 계대배양 중에 세포 모양이나 성질이